15世紀末期，為米蘭公爵盧多維科·斯福爾扎的情婦切奇利婭·加萊拉尼創(chuàng)作了《抱銀鼠的女子》?！侗сy鼠的女子》是達·芬奇杰出的肖像畫作品，體現了深厚的寫實功力。這幅精美的肖像畫，畫面人物氣質高貴沉靜，女郎懷抱的白貂毛色光潤，栩栩如生，充滿朝氣，充分體現了達·芬奇高超的繪畫技巧，而形態(tài)逼真的白貂使畫面生動了起來。這幅肖像畫最引人注目的地方是明暗的處理，畫家運用光線和陰影襯托出切奇莉亞優(yōu)雅的頭顱和柔美的臉龐。形神兼?zhèn)洌沟眠@幅肖像畫得到世人的推崇。

1500年達·芬奇回到佛羅倫薩，隨著共和國制度的恢復，文化氣氛一度活躍，畫壇上也先后出現了米開朗基羅、拉斐爾等杰出人物。達·芬奇開始為蘭則塔大教堂的主祭壇創(chuàng)作《圣母子與圣安娜、圣約翰》，他向市民展出的一幅經過精心構思的《圣母子與圣安娜、圣約翰》素描草圖，立即引起轟動，其構圖原理和畫法對藝術界有極大影響，米開朗基羅和拉斐爾等人也從中得到啟發(fā)。

1503年他一面著手為市政廳繪制壁畫《安吉里之戰(zhàn)》，一面創(chuàng)作《蒙娜麗莎》和《圣母子與圣安娜、圣約翰》(后稱為《圣母子與圣安娜》)，這兩幅畫和《施洗者圣約翰》一起成為他極為珍愛的作品，始終帶在身邊，晚年移居法國也不離左右，最后遺存巴黎。1499年為躲避戰(zhàn)亂，達·芬奇在曼圖亞和威尼斯等地旅游并進行一些科學研究。

達·芬奇之死：

達·芬奇晚年被法蘭西國王弗朗索瓦一世邀入法國，弗朗索瓦一世給予了他至高的接待，將其安置于昂布瓦斯城堡中的克魯克斯莊園，并時不時地去請教。1519年5月2日，年事已高的達·芬奇因病逝世了，據說他是在趕來的弗朗索瓦一世懷中咽下了最后一口氣。他最鐘愛的學生弗朗西斯科·梅爾茲(達·芬奇臨終前將所有繪畫作品和大量手稿都托付給了他)說:"達·芬奇的死，對每一個人都是損失，造物主無力再造出一個像他這樣的天才了。"